title

Связь между концентрацией ГАГов и кислородным режимом

Связь между концентрацией ГАГов в ткани и кислородным режимом в ней можно продемонстрировать на модели перфузии изолированной селезенки. Эта методика имеет ряд достоинств, состоящих в том, что исключаются образование ГАГов в других органах, перераспределение их между органами и избыточное поступление в селезенку субстратов для синтеза ГАГов. Для решения поставленной задачи наиболее удобна разработанная О. Г. Макеевым (1981 г.) микроперфузионная система.

Перфузия селезенки кролика осуществляется перфузатом следующего состава, %: аутосыворотка 45, среда 199—45, ТРИС-НС1 буффер (3,66 % раствор) 10. В перфузат добавляется гепарин в количестве 1 ед. на 1 мл. Температура перфузата 37° С, pH 7,35. В орган он подается под давлением 132—173,3 гПа. Скорость протока через орган 1,5 мл/мин, р02 перфузата регулируется подачей в оксигинатор газовых смесей различного состава. В нормоксическом варианте р02 перфузата составляет 17,3—20,0 кПа (pO2 артериальной крови интактного кролика 10,7—13,3 кПа) и достигается подачей в оксигенатор газовой смеси состава: 95 % воздуха и 5 % СO2.

В гипоксическом варианте этот показатель равен 6,9 кПа (64,5 % азота, 30,7 % воздуха и 4,8 % CO2), а в гипероксическом — 66,70 кПа (95 % 02 и 5 % CO2). В результате рO2 в селезенке составляет 5,23+2,0 кПа при нормоксической перфузии, 0,674+0,052 кПа при гипоксической и 12,24+ 1,4 кПа при гипероксической.

После 6-часовой перфузии органа в нем так же, как и в жировых клетках костного мозга после 6-часовой ишемии, резко возрастает концентрация кислых ГАГов (19,10+2,88 мг/г, p<0,001 при нормоксической перфузии) по сравнению с селезенкой интактного кролика (3,87+0,53 мг/г). Она не зависит от р02 перфузата (рис. 3). Очевидно, что этот эффект обусловлен тем, что проток перфузата через орган—1,5 мл/мин, или 450 мл-мин/100 г массы, ниже кровотока в нем у интактных животных (897 мл-мин/ 100 г массы). Возрастание концентрации кислых ГАГов в перфузируемой селезенке сопровождается снижением концентрации нейтральных (1,83 + 0,21 мг/г, Р<0,001 при нормоксической перфузии, в интактном органе их 6,78+0,22 мг/г), что отражает реакцию самого органа на перфузию. Изменение же на этом фоне кислородного режима органа влечет за собой изменение в нем нейтральных ГАГов без заметной реакции со стороны кислых (см. рис. 3). В гипоксических условиях концентрация этих веществ значительно выше, а в гипероксических— ниже, чем в условиях нормоксической перфузии.